مختبرات اليمن
حللت اهلا وتصفحت علما
نورك ولا نور الميكروسكوب
نتمنى لك الفائده

تـشرفنا بحضورك



 
الرئيسيةاليوميةمكتبة الصورس .و .جالأعضاءالتسجيلدخول

 اهــــلا وسهلا بكم في  مختبرات اليمن المنتدى المتخصص بعلوم المختبرات الطبيه 

Welcome in Yemen-lab the forum which specialized in medical laboratories

شاطر | 
 

 طريقة الاليزا (ELISA)

استعرض الموضوع السابق استعرض الموضوع التالي اذهب الى الأسفل 
كاتب الموضوعرسالة
MR.ADMIN


avatar

؟
عدد المساهمات : 285
تاريخ التسجيل : 18/03/2011

مُساهمةموضوع: طريقة الاليزا (ELISA)   الجمعة مارس 25, 2011 3:26 pm

طريقة الاليزا (ELISA)

( Enzyme linked immunsorbent assay)


طريقة الاليزا :-

تستخدم هذه الطريقه بصورة كبيرة فى تحاليل المناعة والهرمونات وكذلك الفيروسات .

فكرة الاختبار:-
تعتمد فكرة هذه الطريقة على معلومة هامة فى علم المناعة وهى فكرة المناعة المتخصصة والتى تتلخص فى أنه عند دخول جسم غريب الى جسم الانسان (فيرس معين مثلا ) يقوم جهاز المناعة بتكوين أجسام مضادة مناعيه ضد انتيجينات هذا الجسم الغريب وتظل موجودة فى الجسم فيما يسمى الذاكرة المناعية , تكون هذه الاجسام المضادة خاصة للأنتيجين الذى تكونت من أجلة فقط ومن هنا تأتى الفكرة فعندما نريد أن نبحث عن انيجين أو فيرس معين فى عينة لشخص ما نأتى بالاجسام المضادة المتخصصة له فترتبط به والعكس صحيح .


شرح طرق القياس الكيميائى ( طريق الاليز ) وهما طريقتان:-


أولا الطريقه المباشرة (Direct Elisa ) :- احدى الطرق التى تستخدم لتحديد نسبة انتيجين مجهول فى العينة (اى الميكروب نفسه)

ثانيا الطريقه الغيرمباشرة(InDirect Elisa) :- وهى تحديد نسبة أجسام مضادة فى العينة . (مضادات الميكروب)



* طريقة الاليزا المباشرة Direct Elisa

فى الاليزا عادة نستخدم أطبافق الاليزا وهو طبق مكون من صفوف وكل صف مكون من 8 ويلات (نقرات) وعادة يكون الطبق 96 ويل.



فى الطريقة المباشرة نبحث عن أنتجين مجهول
2- تكون جدران الويلات مغطاة بالاجسام المضادة الخاصة بالانتيجين المراد الكشف عن وجودة
3- عند اضافة العينة الى الويل تقوم الاجسام المضادة الموجودة على جدران الويل بالارتباط بالانتيجن اذا وجد فى العينة
4- يتم غسيل الويل للتخلص من الاجسام المضادة غير المرتبطة والانتيجنات الاخرى الغريبة ويتبقى الانتجين المطلوب مرتبط بالجسم المضاد الوجود على جدار الويل
(antibody antigen complex) يسمى الجسم المضادالمرتبط بالانتجين (معقد الانيجين والجسم المضاد




- يتم اضافة جسم مضاد أخر يكون مميز او معلم بواسط انزيم يتفاعل هذا الجسم المضاد الثانى مع معقد الانتيجين والجسم المضاد
- تكرر عملية الغسيل مرة أخرى للتخلص من الاجسام المضادة غير المرتبطة
- يتم اضاف الخطوة الاخيرة وهو مركب (substrate or tmb) يقوم الانزيم المرتبط فى الجسم المضاد الثانى بتحويلة من مادة عديمة اللون الى لون .












بعد ذلك يتم وضع محلول لوقف التفاعل يسمى ( Stop solution )
يتم القراءة على جهاز قراءة الاليزا عند الطول الموجى المناسب


تتناسب قوة امتصاص هذا اللون مع تركيز الانيجين المجهول فى العينة
ويأتى مع كل كيت اليزا عدة استاندرات - محاليل قياسيه (6 غالبا) بتركيزات متدرجة معلومة يتم عمله مع الاختبار المطلوب ثم يتم رسم منحنى قياسى يمثل العلاقة بين قوة التركيز concentration الامتصاص absorbance
ويتم حساب النتائج من هذا المنحنى .


* طريقة الاليزاغير المباشرة In Direct Elisa

نفس خطوات الاليزا المباشرة ولكن فى هذه الطريق نبحث عن الاجسام المضادة المجهولة فى العينة فتكون العكس جدران الويلت مغطاة بالانتيجنات الخاصة بالاجسام المضادة المراد الكشف عنها وباقى الخطوات هى نفسها ولعل اشهر الامثلة لهذا النوع الاليزا الخاصة بالكشف عن الاجسام المضادة بفيروس (C الكبدى).



أنواع الاختبارات لفحص الايدز

اELISA و اختبار Rapid test، أما اختبار Western Blot أقدر على تشخيص حالة
اختبارات الأجسام المضادة:
هذا النوع من الاختبارات يكشف عن الأجسام المضادة مثلا لفيروس مثل المسبب لنقص المناعة البشر يه الايدز و لا يكشف عن وجود الفيروس نفسه، فعندما يغزو فيروس (الإيدز) المسبب نقص المناعة البشرى الجسم يدخل في خلايا CD4 اللمفاوية و هي إحدى فئات كرات الدم البيضاء، فيرد جهاز المناعة على هذا الغزو بإنتاج الأجسام المضادة لمحاربة العدوى ، و تعتمد اختبارات الأجسام المضادة على الكشف عن وجود هذه الأجسام كدليل على وجود الفيرس.

_________________
[ندعوك للتسجيل في المنتدى أو التعريف بنفسك لمعاينة هذه الصورة]


عدل سابقا من قبل محمد باحـــــسـن في الجمعة مارس 25, 2011 11:43 pm عدل 1 مرات
الرجوع الى أعلى الصفحة اذهب الى الأسفل
http://yemenlab.7olm.org
دكتورقروش



عدد المساهمات : 42
تاريخ التسجيل : 21/03/2011

مُساهمةموضوع: مشكوووور   الجمعة مارس 25, 2011 11:38 pm

بسم الله الرحمن الرحيم

مشكور اخوي محمد
على هل الموضوع القيم

متمنيا لك دوام الصحه والعافيه والتالق
DR.
grooch
الرجوع الى أعلى الصفحة اذهب الى الأسفل
MR.LAB


avatar

عدد المساهمات : 55
تاريخ التسجيل : 25/03/2011

مُساهمةموضوع: THANK YOU   السبت مارس 26, 2011 3:33 am

موضوع مفيد وقيم
وجهاز الاليزا من الاجهزه المهمه في كل مختبر

شاكر لك هل المعلومات القيمه

تقبل مروري

MR.LAB

sunny sunny sunny
الرجوع الى أعلى الصفحة اذهب الى الأسفل
 
طريقة الاليزا (ELISA)
استعرض الموضوع السابق استعرض الموضوع التالي الرجوع الى أعلى الصفحة 
صفحة 1 من اصل 1

صلاحيات هذا المنتدى:لاتستطيع الرد على المواضيع في هذا المنتدى
مختبرات اليمن :: القسم التخصصي :: علم المناعه والامصالImmunology and seriology-
انتقل الى: